روش انجام آزمایش mpn

زمان مورد نیاز برای مطالعه: 3 دقیقه

روش انجام آزمایش mpn

 

روش انجام آزمایش mpn  به صورت 15لوله ای شامل سه سری پنج تایی از محیط لاکتـوز بـراث 10 cc حـاوی لولـه دورهام می باشد. لازم به ذکر است که در لوله های سری اول محـیط کـشت بـا غلظـت دوبـل آن وارد شـد. سـپس 10 cc از نمونه آب به سری اول لوله ها و 1ccبـه سـری دوم و 0.1 cc از نمونه آب به سری سوم لوله ها اضافه شـد. در نهایـت تمـامی لوله ها در انکوباتور 37 درجه سانتیگراد گرماگذاری شدند. پس از ۲۴ ساعت لوله ها از نظـر تولیـد گـاز بررسـی شـدند. چنانچـه گـاز تولید نشده بود مجددا 24ساعت دیگر گرماگذاری می شد. در صورت تولید گاز از هر لوله مثبت به اندازه 1cc بـه محـیط EC بـراث (Escherchia coli broth) و 1 cc بـه محـیط پپتـون واتـر اضـافه مـی شـد.  بـه مـدت 24سـاعت در بـن مـاری 44,5 درجه سانتیگراد گرماگذاری می شدند.

س از طـی مدت ۳ روز چنانچه در لولـه هـای حـاوی محـیط EC بـراث گـاز تولید شده بـود. 0.5 cc معـرف کـواکس بـه لولـه هـای حـاوی پپتون واتر اضافه نموده. در صورت مثبـت بـودن انـدول، از لولـه های حاوی محیط ECبراث در محیط مک کانکی آگار کشت داده و بـه مـدت 24سـاعت در دمـای 37درجـه گرماگـذاری شدند.  پرگنه های به وجود آمده را روی محیط مک کانکی آگار خالص شدند. سپس نتیجه وجود یا عدم وجود اشرشیاکلی تایید می گردد.

بر اساس جدول که بر روش انجام آزمایش mpn  استوار است می توان مقادیر کلی فرم گوارشی و کل کلی فرم را تعیین کرد.

اصولا آبی که به مصرف آشـامیدن مـی رسـد بایـد از میکرو اورگانیـسم هـای بیمـاریزای شـناخته شـده و همچنـین باکتریهای نشانگرکه نشانه آلودگی آب با مدفوع است عاری باشد. اندیکاتور های زیـادی بـرای ارزیـابی کیفـی آب مـورد مطالعه قرار گرفته، توصـیه شـده اسـت. مـثلادر تعیـین منـشا
آلــودگی آب بــا مــدفوع وارزشــیابی کــارایی روش هــای گندزدایی آب از انتروکوکهـای مـدفوعی وکلـستریدیم هـای احیا کننـده سـولفیت نیـز مـی تـوان بـه عنـوان نـشانگر اضـافی استفاده کرد. اما به دلیل سهولت وسرعت جداسازی وشناسـایی ،جستجوی اشریشیا کلی و کلی فـرم هـای گرمـا پـای مناسـبتر است.

برای مشاهده و شمارش E coliو کلی فرم ها محیط هـای انتخـابی ، افتراقـی و روش هـای خاصـی مانند روش انجام آزمایش mpn  لازم اسـت. از جملـه روش هــــایی کــــه در حــــال حاضــــر در آزمایــــشگاههای میکروبیولوژی برای شناسایی و شمارش E coliوکلی فـرم هـا به کار می رود، عبارتند از:

  • روش تخمیر در لوله های چندتایی MPN
  • روش پورپلیــت
  • روش فیلتراســیون غــشایی ( روش حضور وغیاب)

روش انجام آزمایش mpn و آلودگی آب تهران :

در نمونه برداری آب چاه از پارک های مناطق مختلف در شهر تهران از نظر آلودگی به اشریشیاکلی مورد بررسی قرار گرفـت. نتـایج به دست آمده نشان می دهد کـه%54.5 نمونـه هـای آبتهیه شده غیر قابل مـصرف مـی باشـند. ایـن نتـایج بیـانگر آن است کـه نمونـه هـای آب چـاه در جنـوب تهـران از در صـد آلودگی بیشتری نسبت به سایر نقاط داشتند.

 

روش انجام آزمایش mpn


در مـورد روش های جـدیـد و سـنتـی در عـرصـه جدا سـازی و شمارش کلی فرم ها در آب آشامیدنی انجام داده اند. بـه ایـن نتیجه رسیدند که متد های سـنتی روتـین شـامل
MPN, MF بـا استفاده از محیط های کلاسیک اختصاصی،دارای محدودیت هـــایی نظیـــر مـــدت زمـــان تلقیح،تـــداخل آنتاگونیـــستیمیکروارگانیسم ها،شناسایی ضعیف میکروارگانیسم هـای کنـد. رشــد غیــر قابــل کــشت Viable But Not VBNC Culturableمی باشند.اما امروزه ، به ویژه تکنیـک فیلتراسـیون غـشایی ، MFبـا اسـتفاده از محـیط هـای کـشت بـا فعالیـت اختصاصی آنزیمی ،حساسیتش به مراتب ا فـزایش یافتـه اسـت.

 

مقالات پیشنهادی

شناسایی یون سولفید

شناسایی یون سولفید شناسایی یون سولفید با توجه به ساختار سولفید که در آب های زیرزمینی مخصوصا در فصل بهار بیشتر یافت می شود. به طور معمول یون سولفید در فاضلاب هایی وجود دارد که ترکیبات عمده فاضلاب مواد آلی می باشند.بعضی وقت ها در فاضلاب های صنعتی می توان به شناسایی یون سولفید دست […]

شاخص رایزنر

شاخص رایزنر : شاخص رایزنر ، از شاخص های مهم  برای خورندگی آب می باشد که در آزمایشگاه آب و فاضلاب آبرام محاسبه میگردد. آب میتواند باعث خوردگی خطوط انتقـال و توزیـع و نیز ایجاد لایه های ضـخیم رسـوبی بـر روی سـطوح و دیواره های تاسیسات تبادل حرارتی گردد. خوردگی بر اساس یک واکنش فیزیکی شـیمیایی […]

غلظت توده بیولوژیکی

غلظت توده بیولوژیکی بدليل اينكه توده بیولوژیکی اغلب ماده آلي است،افزايش غلظت توده بیولوژیکی بوسيله جامدات معلـق فـرارVSS يـا CODذره اي (كل CODمنهاي CODمحلول) اندازه گيري مي شود. ميـزان پـروتئين، DNAو ATPو تركيب سلولي مرتبط با انتقال انرژي پارامترهاي ديگري هستند كه براي تعيـين رشـد جـرم سلولي مورد استفاده قرار مي گيرد. در بين اين پارامترهاي اندازه گيري رشد […]

فیتوپلانکتون آب

فیتوپلانکتون آب فیتوپلانکتون آب  دسته ی پلانکتون ها یا دروایان هستند. پلانکتون ها یا دروایان موجودات زنده ای هستند که بسیار ریز و معلق در آب هستند و توسط جریان آب حرکت می کنند. اندازه آنها بین 1 میکرون تا 20 سانتی متر متغیر است. فیتوپلانکتون ها جزء دسته ی پلانکتون های خودپرور هستند که […]

پارامترهای آزمایش آب

پارامترهای آزمایش آب

پارامترهای آزمایش آب پارامترهای آزمایش آب شامل پارامترهای میکروبی، فیزیکی – شیمیایی و فلزات سنگین می باشد. این پارامترها بر حسب مشکلات ظاهری و کیفی مشاهده شده در آب و همین طور تأثیری که روی بدن، تاسیسات و یا سایر موارد دارد و در واقع مشکلاتی که ایجاد می کند، انتخاب می شوند. به علاوه […]

فرآیند نیتریفیکاسیون

فرآیند نیتریفیکاسیون فرآیند نیتریفیکاسیون ،طی فرآیند تصفیه فاضلاب اتفاق می افتد که طی نيتريفيكاسيون براي توصيف فرآيند بيولوژيكي دو مرحله اي اسـت كـه آمونيـاك به نيتريت و نيتريت به نيترات اكسيد مي شود. نياز به فرآیند نیتریفیکاسیون در تـصفيه فاضـلاب بـه دليـل ملاحظات كيفي آب است. اين ملاحظات عبارتند از: اثر آمونياك بر آبهـاي دريافـت كننـده از […]

مرحله احتمالی در تشخیص کلی فرم های آب

مرحله احتمالی در تشخیص کلی فرم های آب

مرحله احتمالی در مرحله تشخيص احتمالي روش تخمير چند لوله اي از آبگوشت لوريل تريپتوز به عنوان محيط كشت استفاده مي شود . در صورتي كه محيط كشت بعد از سترون شدن در يخچال نگهداري شده باشد، قبل از استفاده بايد به مدت يك شب درانكوباتور oC35 قرار گيرد . پس از اين مدت، مرحله احتمالی در […]

سختی گیر

سختی گیر

سختی گیر: متداولترین روش براي حذف سختی آب، استفاده سختیگیرهاي رزینی(water softner) میباشد . دستگاههاي سختی گیر مورد استفاده در تصفیه آب ، بیشتر به صورت استوانه فلزي هستند, به طوري که در داخل آن، ذرات رزین را قرار میدهند و داخل سطوح آن با اپوکسی پوشش داده شده  است تا از خوردگی آن جلوگیري و باعث […]

اندازه گیری فیتوپلانکتون

اندازه گیری فیتوپلانکتون اندازه گیری فیتوپلانکتون ،به عنوان مواد تشکیل دهنده های اصلی که در جوامع آبزی زندگی می کنند و در چرخه اصلی مواد غذایی آبزیان قرار دارند. به همین دلیل آزمایش اندازه گیری فیتوپلانکتون دارای اهمیت فراوانی است. همچنین در محیط های آبی باید اثراتی که ممکن است بر محیط های آۤبی داشته باشد […]

کشت میکروارگانیسم های آب

کشت میکروارگانیسم های آب

اصول کلی این روش ها شامل تلقیح حجم معینی از نمونۀ آب به محیط های کشت جامد یا مایع است. فرض بر این است که پس از گرمخانه گذاری ، هر میکروارگانیسم تکثیر می یابد و ایجاد کلنی قابل مشاهده روی محیط کشت جامد و یا تغ ییرات ظاهری در محیط کشت مایع می کند. […]

نظرات کاربران

ارسال دیدگاه
  • دیدگاه های ارسال شده توسط شما، پس از تایید در وب سایت منتشر خواهد شد.
  • پیام هایی که حاوی تهمت یا افترا باشد منتشر نخواهد شد.
  • مجموع دیدگاهها: 2
  • در انتظار بررسی: 0
  • انتشار یافته: 0

هنوز دیدگاهی ثبت نشده است.

سوالی دارید؟ منتظر تماس شما هستیم

برای دریافت مشاورۀ رایگان، همین حالا با کارشناسان ما تماس بگیرید