طرز تهیه محیط های کشت میکروبی

زمان مورد نیاز برای مطالعه: 2 دقیقه

طرز تهیه محیط های کشت میکروبی

طرز تهیه محیط های کشت میکروبی ، معرف های که در آزمایشگاه میکروب شناسی آب و فاضلاب مورد استفاده قرار می گیرد، متفاوت است. در ایتجا به تشریح ساخت محیط کشت لاکتوز ، سوربیتول ،آزمون های تخمیر سلولی ، تست ایندول و تست متیل رد می پردازیم. بر اساس کتاب استاندارد متد ، واکنشهای بیوشیمیایی انواع کلیدی خانواده Enterobacteriaceae بر اساس جدول زیر می باشد. 

 

طرز تهیه محیط های کشت میکروبی

مقدار ۱۶ گرم محیط کشت فنول رد و مقدار ۵ گرم کربوهیدرات را در یک لیتر آب مقطر یک بار تقطیر شده حل شود. سپس بر روی استرینگ چرخانده شود تا کامل حل شود. سپس در لوله های آزمایش تا اندازه ای به ارتفاع یک سوم لوله ها پر شوند. در زمان آزمایش بمنظور تعیین حباب دار شدن و تولید اکسیزن در لوله ها، در حین آزمایش دورهام هایی در لوله های آزمایش که دارای محیط کشت می باشند، انداخته شود. سپس درب های لوله ها گذاشته شود و در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه در اتوکلاو استریل شوند. سپس نمونه ها را در محیطی تاریک مانند یخچال نگه داری شود و رطوبت آن بیشتر از ۱۰ درصد نشود.

در حین انجام آزمایش ، لوله های آزمایش را با لوپ های که دارای کلونی می باشند ، از قسمتی که کلونی ها به خوبی رشد کرده اند برداشته و در لوله های آزمایش توزیع کرده و به مدت ۲۴ ساعت تا ۴۸ ساعت در دمای ۳۵ درجه سانتیگراد قرار بگیرد. تخمیر کربوهیدرات (تولید اسید) شاخصی می باشد که با کاهش پی اچ همراه است و در نتیجه شاخص پی اچ ، فنول رد ،از رنگ نارنجی به رنگ قرمز تغییر رنگ می دهد. به جای استفاده از تخمیر لاکتوز ، می توان از محیط کشت لاورل تریپتوز(بر اساس استاندارد شماره 9221B) نیز استفاده کرد.

طرز تهیه محیط های کشت میکروبی ایندول

ایندول محصول متابولیسم تریپتوفان است. و از ری ایجنت های زیر استفاده می شود.

  • برای تهیه محیط کشت از محیط کشت تریپتوفان  tryptophane استفاده می شود. مقدار ۱۰ گرم تریپتون یا تریپتیکیس در یک لیتر آب مقطر تقطیر شده حل شود. توزیع شود و سپس در ۵ میلی لیتر توزیع شود و سپس لوله ها ریخته شود و استریل شود.
  • مقدار ۵ گرم p-dimethylaminobenzaldehyde در ۷۵ میلی لیتر الکل ایزوآمیل ریخته شود و در مقدار ۲۵ میلی لیتر هیدروکلریک اسید تغلیط شده، حل شود. ری ایجنت باید زرد باشد. محلول الکل آمیل باید دارای پی اچ کمتر از ۶ باشد. هر دو مورد الکل آمیل و بنزوآلدهید در یک مقدار کوچک تهیه شود.
  • مقدار ۵ میلی لیتر از مدیا رااز یک محیط کشت غلیظ برداشته و در دمای ۳۵ درجه سانتی گراد به مدت ۲۴ ساعت در انکوباتور گذاشته شود. سپس مقدار 0.2  یا 0.3 میلی لیتر ری ایجنت روی آن ریخته شود و سپس تکان داده شود. به مدت ۱۰ دقیقه منتظر مانده تا نتیجه مشاهده شود.

 

پاسخ مثبت و منفی نمونه ها در تست ایندول

 

مقالات پیشنهادی

آزمایش اندازه گیری چگالی آب

آزمایش اندازه گیری چگالی آب آزمایش اندازه گیری چگالی آب با استفاده از چگالی متر دقیق ارتعاشی (لرزشی) جریان قابل اندازه گیری است که این قابلیت را دارد که چگالی نمونه های آب طبیعی را اندازه گیری کند. آزمایش اندازه گیری چگالی آب با گذراندن نمونه آب از یک تیوب ارتعاشی (لرزشی)  که دریک محیط با دمای […]

تغییر رنگ نمونه بر اثر تیتر با پتاسیم پرمنگنات

روش اندازه‌گیری مواد آلی در آب

روش اندازه‌گیری مواد آلی در آب اساس کار روش اندازه‌گیری مواد آلی در آب بر مقدار مصرف پتاسیم پرمنگنات که جهت اکسیداسیون استفاده می‌شود، قرار دارد. در این روش پتاسیم پرمنگنات اضافی به وسیله اگزالیک اسید مشخص می‌گردد، لازم به توضیح است که کلیه اجسام احیاء کننده که خود اکسید می‌شوند مانند NO2–  و Fe+2 […]

استانداردهای طراحی آزمایشگاه آب

استانداردهای طراحی آزمایشگاه آب هدف از رعایت استانداردهای طراحی آزمایشگاه آب ، فراهم کردن یک محیط بی خطر است تا کارکنان آزمایشگاه ، در آن محیط به انجام فعالیت بپردارند. دومین هدف در نظر گرفتن استانداردهای طراحی آزمایشگاه آب برای استفاده در فعالبت های آموزشی و پژوهشی است. در کل باید تجهیزات و پارامتر های […]

منیزیم آب- اندازه گیری منیزیم

منیزیم آب:  منیزیم (Mg) دومین عنصر در گروه دو جدول تناوبی (گروه فلزات قلیایی خاکی)، با عدد اتمی 12، جرم مولی g/mol 24/3 و ظرفیت 2 است. از نظر فراوانی، منیزیم در حدود2/1 درصد وزن پوسته زمین را تشکیل می دهد و از 0/03 تا 0/84 درصد وزن خاک ها را شامل می شود. در […]

آزمایش BOD5 و COD در فاضلاب

آزمایش BOD5 و COD آزمایش BOD5 و COD در فاضلاب یکی از شاخص های تعیین کننده برای طراحی تصفیه خانه فاضلاب و آلاینده بودن فاضلاب بهداشتی و صنعتی است. شاخص اصلی بار آلودگی، غلظت اکسیژن خواهی بیوشیمیایی 5 روزه (BOD5) است. برای تعیین بار وارده به تصفیه خانه ، محاسبه میانگین شناور 7 روزه، و […]

استاندارد آب بویلر

استاندارد آب بویلر استاندارد آب بویلر ، بستگی به پارامتر های شیمیایی و فیزیکی و فلزات سنگین موجود در نمونه آب دارد. از جمله این پارامتر ها می توان به سیلیس ، آلومینیوم ، آهن، منگنز،کلسیم،منیزیوم،آمونیاک،بی کربنات،کل املاح محلول،مس، روی، سختی کل،قلیائیت،پی اچ،اكسيژن خواهي شيميايي و مواد معلق اشاره کرد. تعیین مقدار بهینه این مواد […]

آب مجازی

آب مجازی آب مجازي، جمع کل آب مورد نیاز براي تولید مقدار معینی از محصول ، با توجه به شرایط اقلیمی، مکانی، زمان و راندمان تولید میباشد. سالانه حجم زیادي آب صرف نوشیدن، پخت و پز، شست و شو و سایر فعالیتهاي انسان میشودکه به عنوان مصارف مستقیم آب میتوان از آنها یاد کرد، اما احجام بسیار بیشتري از […]

روش کار جارتست

روش کار جارتست آزمایش جار معروف به “جار تست” یک تکنیک شبیه‌سازی فرآیند انعقاد  لخته‌سازی در ابعاد نیمه صنعتی است. در این شیوه، استفاده از روش انعقاد برای حذف ذرات معلق در انواع مختلفی از پساب‌ها، امکان‌سنجی می‌شود. به این مفهوم که امکان کاربرد روش انعقاد برای هر نوع خاص از پساب مورد ارزیابی قرار […]

قلیائیت آب

قلیائیت آب

قلیائیت آب : ظرفیت آب برای خنثی سازی اسید را قلیائیت می نامند. بنابراین، قلیائیت برخلاف اسیدیته، یعنی ظرفیت آب برای خنثی سازی باز، است. قلیائیت آب های طبیعی عمدتاً مربوط به نمک های اسیدهای ضعیف است، لیکن بازهای ضعیف یا قوی نیز ممکن است در آن مشارکت داشته باشند. بی کربنات ها عمده ترین […]

هدایت الکتریکی

هدایت الکتریکی هدایت الکتریکی ، معياري از توان آب براي هدايت جريان الكتريكي ميباشد که اين ويژگي با کل غلظت مواد يونيزه شده در آب(يونهاي مثبت ومنفي )ودمايي که اندازه گيري در آن انجام مي شود مرتبط مي باشد . هدايت الکتريکی آب را با دستگاهی به نام کنداکتيويتيمتر اندازه گيری وبراساس واحد ميکروموس بر سانتيمتر […]

نظرات کاربران

ارسال دیدگاه
  • دیدگاه های ارسال شده توسط شما، پس از تایید در وب سایت منتشر خواهد شد.
  • پیام هایی که حاوی تهمت یا افترا باشد منتشر نخواهد شد.
  • مجموع دیدگاهها: 0
  • در انتظار بررسی: 0
  • انتشار یافته: 0

هنوز دیدگاهی ثبت نشده است.

سوالی دارید؟ منتظر تماس شما هستیم

برای دریافت مشاورۀ رایگان، همین حالا با کارشناسان ما تماس بگیرید